改良Gomori网状纤维染色减少背景染色的体会

・１２５４・　『临床与实验病理学杂志Ｊ　Ｕｉｎ　Ｅｘｐ　Ｐａｔｈｏｌ　２０１１　Ｎｏｖ；２７（１１）　改良Ｇｏｍｏｒｉ网状纤维染色减少背景染色的体会　朱育连，黄海建，熊喜生，郑智勇　关键词：Ｇｏｍｏｆｉ染色；网状纤维；肝组织；改良　中图分类号：Ｒ４４６　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００１—７３９９（２０１１）１１—１２５４—０２　例、丙型肝炎２００例、肝内胆管细胞癌５０例、肝内胆管结石　１０５例、原发性胆汁性肝硬化６例、自身免疫性肝炎１０例、肝　局灶性结节性增生４例。其中４００例用改良Ｇｏｍｏｒｉ染色，　４０７例标本做经典Ｇｏｍｏｒｉ染色。　Ｇｏｍｏｒｉ网状纤维染色是日常病理工作中最常用的网纤　染色法。经典的Ｇｏｍｏｒｉ染色Ⅲ容易造成背景着色，我们采　用改良的Ｇｏｍｏｆｉ染色　，用于肝组织网纤染色获得较好效　果，现介绍如下。　１材料与方法　１．２试剂　（１）０．５％酸化高锰酸钾溶液：０．５％高锰酸钾水　溶液与０．５％硫酸水溶液按】：１现配现用。（２）Ｇｏｍｏｆｉ氨　银液：用小量杯盛入１０％银１．５　ｍｌ，缓慢滴人１０％的氢　氧化钾０．５　ｍｌ，即产生灰黑色沉淀物，记录溶液总量；加蒸馏　水至１０倍以上振荡洗涤，静置待大部分颗粒沉淀后，吸去上　清液，反复３次，最后用蒸馏水补足原先剂量。逐滴缓慢加　浓氨水并不断摇荡，直至沉淀物逐渐溶尽，至余留少量微颗　１．１材料收集我科２００８～２０１１年肝组织蜡块共８０７例。　其中正常肝脏标本（移植供肝零点活检）３２例、乙型肝炎４００　收稿日期：２０１１—０７—２９　粒为止，使产生的二胺银铬复合物浓度达到饱和。加蒸馏水　至原溶液总量的１０倍，沉淀后使用或棕色瓶避光４　ｑＣ下冷　藏备用，使用前恢复至室温。（３）Ｍａｓｓｏｎ染色液：变色酸２Ｒ　０．３　ｇ＋磷钨酸０．４　ｇ＋冰醋酸０．５　ｍｌ＋双蒸馏水５Ｏ　ｍｌ混　作者单位：南京军区福州总医院病理科，福州３５００２５　作者简介：朱育连，女，技师。Ｔｅｌ：（０５９１）２４９３７０９５，Ｅ．ｍａｉｌ：　ｘｌ５３７０８９１＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ　匀、溶解、过滤，室温保存待用。（４）０．１％固绿染色液：固绿　０．０５　ｇ＋冰醋酸０．５　ｍｌ＋双蒸馏水５０　ｍｌ混匀、溶解、过滤，　室温保存待用。所用试剂均为国产分析提纯。　１．３染色方法改良Ｇｏｍｏｉ染色法：（１）石蜡切片常规脱　ｆ郑智勇，男，教授，主任医师，硕士生导师，通讯作者。Ｅ．　ｍａＩ１：７６８２０３５６６＠ｑｑ．ｃｏｍ　能与溶液中的阳离子结合，部分碱性物质能与溶液中的阴离　子结合。在细胞核中，特别是核内染色质，一般由酸性物质　组成，故与碱性染料的亲和力强，易于染色。蛋白质既呈酸　料微粒的吸附，促进组织与染料反应。　作为一个合格的病理技术人员，除了熟练掌握石蜡切片　ＨＥ染色的原理及操作过程，还要有高度的敬业心与责任感，　性又呈碱性，为两性物质成分，当染液的ｐＨ值高于组织的　等电点时，较为酸性的组织被碱性染料所染；反之，ｐＨ值低　认真对待、科学处理制片过程的每一步骤，为病理诊断制备　一张优质的石蜡切片。ＨＥ染色是一种多步骤、多因素决定　于等电点时，则碱性的组织被酸性染料所染。　物理反应　：组织中有许多小孔，染料由渗透作用进入　组织；组织通过吸附作用，从周围染液中吸住一些细小的溶　于溶液的化合物或在溶液中单独存在的离子等物质微粒。　病理组织经过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色　等一系列步骤才能制成一张供诊断的组织切片，其中任何一　环都能影响切片的质量。固定剂的作用是固定组织细胞，防　止自溶和，保持细胞原有的形态结构。若固定不及时，　的实验方法，出现个别不理想染色结果的现象是不可避免　的。而该实验方法能简便快速解决核灰染的现象，可应用于　日常外检工作。　参考文献　［１］　马恒辉，周晓军．ＨＥ染色常见问题与对策［Ｊ］．临床与实验病　理学杂志，２００８，２４（４）：４７８—８１．　［２］，张世华，杨淑云，等．ＨＥ染色切片染色质量差的原　组织就会有一定程度的自溶，从而改变细胞内的ｐＨ值。组　织经过脱水、透明后要用石蜡等支持剂透入内部，使其变硬　并将组织包埋进去以利于切片和观察。但是浸蜡用的石蜡　因及处理方法［Ｊ］．诊断病理学杂志，１９９５，２（１）：５２．　［３］孙晓荣，陈［４］　李４．　宇．ＨＥ染色细胞核发灰的补救处理［Ｊ］．齐鲁医　学检验，２００５，１６（４）：６８．　成，贾维民，张希国，等．石蜡切片ＨＥ染色着色不良的　温度过高会损害组织，使细胞中蛋白质的酸、碱性物质均发　生变性，同时组织固缩，其中的间隙变小，而不易被碱性染料　染色；组织在ｐＨ值为７．２～７．４的ＰＢＳ中高压修复后，酸、碱　原因及纠正方法［Ｊ］．内蒙古医学院学报，２００６，１２（２８）：３２３—　［５］　陈龙，周晓春，齐洁敏，等．抗原修复技术在免疫组化中的　性物质部分恢复或接近原带电荷状态，易与染料相结合，同　时组织充分水化、间隙变大，有利于染料的渗透及组织对染　应用［Ｊ］．承德医学院学报，２００４，２１（４）：３２５—７．　［６］　龚志锦，詹铬洲．病理组织制片和染色技术［Ｍ］．上海：上海　科学技术出版社，１９９４：３３—５３．