苯酚-硫酸法原理：即是检测总糖含量，多糖在浓硫酸作用下，水解生成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后与苯酚缩合成橙色的化合物，且颜色稳定（时间长达160min），在波长 490nm 处有最大吸收，其吸光度与总糖含量成线性关系，因此，可以利用分光光度法测定其吸光度，并利用外标法定量。
苯酚 - 硫酸法是测定多糖最常用的一种方法。多糖在浓硫酸作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物，并通过比色法确定含量，该方法具有操作简单、快速、重复性好，显色后稳定性较好等优点，但对有色样品结果易偏高
蒽酮 - 硫酸法是多糖类在浓硫酸作用下水解、脱水，再与蒽酮结合成有色化合物，于最大吸收波长处测吸光度。蒽酮 - 硫酸法稳定性较差，宜新鲜配制并注意避光。
苯酚溶液的配制。称取 100 g 苯酚( 纯苯酚为针状无色结晶) ，加铝片 0.20 g( 先用 1∶6 的盐酸除去铝片表面的氧化铝后再称量使用) ，碳酸氢钠 0.10 g，蒸馏收集 182 ℃的馏分。准确称取 80 g 苯酚( 分析纯，重蒸馏试剂) ，加 20 ml蒸馏水使之溶解，即得浓度 80% 苯酚( 4 ℃冰箱中可避光长期保存) 。其他浓度于临用前以浓度 80%苯酚配制。
蒽酮硫酸试剂的配制。精密称取 2.000 g 蒽酮，溶解到浓度为 80% 的硫酸中，以浓度为 80% 的浓硫酸定容至1 000 ml，现用现配。
怎样检测比色皿是否洗干净
可以做一下UV，测试一下透光率于标准对比
用乙醇清洗后倒立，待干后看是否有划痕
一简单方法：注入水测吸光度，先调零后将两比色皿对调位置，看差值。
最简单的办法，是装了洗涤液之后，用垂直的两个角度测量，看是否一样的谱图
怎样将比色皿洗干净
放在浓硫酸或酒精浸泡
比色皿的两个透光面是不可以用刷子刷的，可以倒入洗洁精，用手轻轻刷，两个透光面一定要小心，不要将其划伤。然后用水将洗洁精冲洗干净后，以表面补挂水珠为干净标准~用蒸馏水冲洗3遍，自然风干即可~
用甲醇或无水乙醇淌洗一下，然后自然风干即可
可以泡在SDS（十二烷基硫酸钠）溶液里面，用的时候用蒸馏水冲洗干净
注意事项
菜籽多糖的脱色
大孔树脂预处理：先用蒸馏水浸泡过夜，使其充分溶胀，然后过滤，接着用95%乙醇浸泡4～6h，然后用95%乙醇洗至流出液加水无白色浑浊。用去离子水冲洗至无乙醇味。再用浓度为5%HCl浸泡大孔树脂4h，然后用去离子水洗至中性，再用浓度为5%NaOH浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，备用。使用时要用滤纸吸干表面水分。
DEAE-纤维素预处理：装柱前要脱气，装柱时要让其自然沉降，当填料到达柱高1/5时，打开柱子下端出口，使水缓慢流出。继续装入填料，使最终填料高度达到柱高2/3。期间要避免气泡和断层的产生，使得柱内填料要均一。上样时用胶头滴管将溶液沿着管壁缓慢加入层析柱内。
Sephadex G-100预处理：装柱前要脱气，装柱时。当凝胶沉下2～3cm 时，打开柱子下端出口，使水缓慢流出。继续装入凝胶，使最终沉降的凝胶高度达到柱高的2/3。期间要避免产生气泡和断层。